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微流控?cái)U(kuò)散測量儀

微流控?cái)U(kuò)散測量儀

更新時(shí)間:2025-02-19

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產(chǎn)品報(bào)價(jià):

產(chǎn)品簡介:微流控?cái)U(kuò)散測量儀Fluidity One-M 是一款用于綜合分析蛋白質(zhì)相互作用以及蛋白質(zhì)性質(zhì)的儀器,它采用微流控?cái)U(kuò)散測量技術(shù)(Microfluidic Diffusional Sizing, MDS),可在溶液中一次性測量分子大小、結(jié)合親和力(KD)、濃度和化學(xué)計(jì)量比。

Fluidity One-M微流控?cái)U(kuò)散測量儀的詳細(xì)資料:

微流控?cái)U(kuò)散測量儀Fluidity One-M 是一款用于綜合分析蛋白質(zhì)相互作用以及蛋白質(zhì)性質(zhì)的儀器,它采用微流控?cái)U(kuò)散測量技術(shù)(Microfluidic Diffusional Sizing, MDS),可在溶液中一次性測量分子大小、結(jié)合親和力(KD)、濃度和化學(xué)計(jì)量比。


微流控?cái)U(kuò)散測量儀產(chǎn)品特點(diǎn):

  • 多參數(shù)測量:Fluidity One-M 可以同時(shí)測量蛋白質(zhì)的親和力、大小、濃度和化學(xué)計(jì)量比,為研究者提供全面的蛋白質(zhì)相互作用數(shù)據(jù)。

  • 廣泛的樣品兼容性:可分析不同緩沖系統(tǒng)中的樣品,包括細(xì)胞裂解液、血清和唾液等多種生理相關(guān)條件下的樣本。

  • 快速高效:僅需25分鐘即可測定24個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)的KD值,樣品消耗量少,每個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)僅需4 µL,總共50-80 µL即可完成一次KD測定。

  • 微流體擴(kuò)散測量(MDS):利用熒光標(biāo)記的蛋白質(zhì)在微流體擴(kuò)散室中的擴(kuò)散行為來測定分子的大小。當(dāng)標(biāo)記的蛋白與結(jié)合伙伴相互作用時(shí),測定到的復(fù)合物大小會隨之變化,從而進(jìn)行相互作用分析。

微流控?cái)U(kuò)散測量儀

應(yīng)用領(lǐng)域:

  • 基礎(chǔ)研究與藥物開發(fā):用于研究復(fù)雜靶標(biāo)(如膜蛋白、多蛋白復(fù)合物或本質(zhì)無序蛋白質(zhì))的相互作用,甚至可以直接分析粗細(xì)胞裂解液、未稀釋血清或血漿中的樣本。

  • 藥物篩選與優(yōu)化:可以在無需純化的情況下,驗(yàn)證和表征不同靶點(diǎn)的相互作用,并深入了解藥物作用機(jī)制。

  • 過程開發(fā)與質(zhì)量控制:在藥物開發(fā)過程中,幫助跟蹤蛋白質(zhì)在優(yōu)化、純化和制劑開發(fā)中的活性變化,并監(jiān)測蛋白質(zhì)的粘度和聚集狀態(tài)。

  • 轉(zhuǎn)化和臨床研究:幫助測量血清中抗體的濃度和親和力,并進(jìn)行藥代動力學(xué)和血清穩(wěn)定性研究。


技術(shù)優(yōu)勢:

  • 無標(biāo)記直接測量:無需預(yù)先校準(zhǔn)或生物物理學(xué)知識,即可直接測量蛋白質(zhì)的大小變化,提供定量且易于解釋的數(shù)據(jù)。

  • 高靈敏度與特異性:利用熒光檢測技術(shù),可在天然環(huán)境(如血清和細(xì)胞裂解液)中對蛋白質(zhì)相互作用進(jìn)行高特異性分析。

  • 無維護(hù)設(shè)計(jì):儀器采用流體無損設(shè)計(jì),操作簡單,且觸屏控制方便,無需頻繁維護(hù)。

  • 云端分析:Fluidity Insight 提供云端實(shí)驗(yàn)優(yōu)化、先進(jìn)算法分析和跨實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)集的分析與可視化,幫助研究者更好地理解數(shù)據(jù)。


技術(shù)規(guī)格:

  • 測量范圍:分子水動力半徑(Rh)為1 – 20 nm,分子量范圍為1.4 kDa – 14 MDa。

  • 靈敏度:對于標(biāo)記的HSA在PBS中的濃度范圍,Alexa Fluor 488為1 nM – 3 μM,Alexa Fluor 647為100 pM – 3 μM。

  • 兼容性:兼容多種緩沖液和生物緩沖系統(tǒng),包括TRIS、HEPES、PBS、NaCl、KCl、TWEEN、DMSO和DMF等。


應(yīng)用案例:

Fluidity One-M 讓蛋白質(zhì)相互作用的分析變得簡單高效,為科研工作者提供了一款可靠、便捷且靈活的實(shí)驗(yàn)工具,可用于廣泛的生物學(xué)和藥物開發(fā)領(lǐng)域。

1. 蛋白質(zhì)相互作用的結(jié)合親和力(KD)以及流體動力學(xué)半徑(Rh)

Fluidity One-W利用微流控?cái)U(kuò)散測量(MDS),可以計(jì)算出蛋白質(zhì)相互作用的結(jié)合親和力(KD)以及流體動力學(xué)半徑(Rh)。

在該圖中,絲氨酸蛋白酶凝血酶與兩個(gè)預(yù)先標(biāo)記的抗凝血酶配體HD22和TBA進(jìn)行了滴定。每個(gè)配體與凝血酶的不同表位相結(jié)合;這些相互作用先前已經(jīng)被很好地描述過了。每個(gè)配體-蛋白質(zhì)復(fù)合物的結(jié)合親和力,以及復(fù)合物和配體的流體動力學(xué)半徑,都符合之前研究報(bào)告得到的數(shù)值。


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2. 天然生物溶液中的蛋白質(zhì)相互作用

Fluidity One-W可以研究蛋白質(zhì)在天然生物溶液中的相互作用,節(jié)省純化的時(shí)間,也可以在天然條件下研究更困難的相互作用。該圖比較了在0.05% 吐溫 20 (PBS-T)磷酸鹽緩沖液和FreeStyle™293培養(yǎng)基中,A蛋白 (SpA)與免疫球蛋白G (IgG)抗體的相互作用。結(jié)果表明,在兩種溶液中的結(jié)合親和力和流體動力學(xué)半徑均無顯著差異。

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3. 復(fù)合物化學(xué)計(jì)量學(xué)的計(jì)算

蛋白質(zhì)復(fù)合物化學(xué)計(jì)量學(xué)的研究是充分理解細(xì)胞通路的關(guān)鍵;從基礎(chǔ)的生物學(xué)過程,到疾病病理和藥物的作用。在計(jì)算結(jié)合親和力(KD)的過程中,F(xiàn)luidity One-W測量了未結(jié)合的標(biāo)記物和復(fù)合物的流體動力學(xué)半徑(Rh)。流體動力學(xué)半徑可以用來推斷蛋白質(zhì)復(fù)合物的化學(xué)計(jì)量學(xué)和溶液中整體的結(jié)合比例與結(jié)構(gòu)。下圖的模型模擬了以1:1、1:2和1:3的比例結(jié)合的SpA-IgG復(fù)合物。紅色帶狀物代表SpA,藍(lán)色帶狀物代表IgG。利用這些模型計(jì)算了三種比例結(jié)合物的Rh假設(shè)值(紅色條形)。Fluidity One-W在100nM濃度下進(jìn)行3次檢測,將測得的Rh平均值(藍(lán)色條形)與這些假設(shè)值做比較。紅色條形上添加了Rh預(yù)測值的10%作為誤差范圍,以表示模型中的最小不確定性。Fluidity One-W通過微流控?cái)U(kuò)散測量的Rh值與1:3結(jié)合比例的SpA-IgG復(fù)合物的Rh假設(shè)值相符。對于折疊或延伸的蛋白質(zhì),Rh和分子量有各自的換算公式。研究化學(xué)計(jì)量學(xué)的同時(shí),也可以分析蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和分子量。

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技術(shù)優(yōu)勢:


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